亚洲日韩乱码中文无码蜜桃臀,无码人妻久久一区二区三区不卡,把高冷校花压在桌上进进出,国产亚洲精品久久久久久国模美

銷售熱線

19126518388
  • 技術(shù)文章ARTICLE

    您當(dāng)前的位置:首頁(yè) > 技術(shù)文章 > 搞定內(nèi)參,駕馭 Western blot 已成功一半

    搞定內(nèi)參,駕馭 Western blot 已成功一半

    發(fā)布時(shí)間: 2021-09-15  點(diǎn)擊次數(shù): 1360次

    western blot 對(duì)絕大多數(shù)實(shí)驗(yàn)新人而言,絕對(duì)是心中痛,一碰就要抓狂。沒(méi)辦法,誰(shuí)讓導(dǎo)師發(fā)話了,WB 做不好,延畢就是分分鐘的事兒。這還真是讓小伙伴們感嘆道,WB 想說(shuō)愛(ài)你不容易。那么為了*馴服 WB,獲得漂亮且理想的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,一個(gè)良好的參照體系就絕對(duì)是*的存在。 

    一般而言,良好的參照體系包括: 

    *體重計(jì)(分子量 marker):可確定蛋白條帶對(duì)應(yīng)的分子量大小 

    *光桿司令(空白對(duì)照):不加一抗和二抗,用于檢測(cè)膜的性質(zhì)的封閉效果 

    *好榜樣(陽(yáng)性對(duì)照):已知量標(biāo)準(zhǔn)產(chǎn)物的正對(duì)照,可檢測(cè)抗體的工作效率


    *打醬油的(陰性對(duì)照):不表達(dá)靶蛋白的組織或樣品,檢測(cè)抗體的特異性 

    *單飛者(二抗對(duì)照):不加一抗,檢測(cè)二抗的特異性。 

    *校正者(內(nèi)參對(duì)照):檢測(cè)標(biāo)本系統(tǒng)和抗體系統(tǒng),減少蛋白定量、上樣過(guò)程中的誤差



    內(nèi)參君的初次登場(chǎng) 

    在此,小編就帶領(lǐng)大家一起來(lái)認(rèn)識(shí)認(rèn)知這位“有名"的內(nèi)參君吧。內(nèi)參(Internal Control),簡(jiǎn)而言之,一般指的是由管家基因編碼表達(dá)的蛋白(Housekeeping Proteins),因其表達(dá)恒定被用于檢測(cè)蛋白表達(dá)水平變化時(shí)的參照物,可確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。



    搞定內(nèi)參,駕馭 Western blot 已成功一半

    Tips: 

    1)在一些文獻(xiàn)報(bào)道中,Erk2、TATA bindingprotein(TBP)以及 c-Jun、c-Fos 等也可被用于核蛋白的內(nèi)參。 

    2)內(nèi)參的選擇需要考慮實(shí)際的實(shí)驗(yàn)環(huán)境。 

    eg:在細(xì)胞增殖相關(guān)試驗(yàn)中,c-Jun 由于自身表達(dá)變化就不適合做內(nèi)參;而在凋亡實(shí)驗(yàn)時(shí),TBP、Lamin 等也不適合作為內(nèi)參。因此設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案的時(shí)候應(yīng)該考慮這些因素并查詢相應(yīng)文獻(xiàn),在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中也應(yīng)該注意如果內(nèi)參表達(dá)出現(xiàn)異常,應(yīng)考慮這方面因素。



    搞定內(nèi)參,駕馭 Western blot 已成功一半



    鋒芒畢露的內(nèi)參君 

    正所謂,養(yǎng)兵千日,用在一時(shí)??墒呛芏鄬?shí)驗(yàn)菜鳥在選好內(nèi)參之后,對(duì)下一步如何發(fā)揮內(nèi)參君的本領(lǐng)感到一愁莫展。那么以下三個(gè)妙招可一解大家的燃眉之急。 

    1、超級(jí)簡(jiǎn)便的標(biāo)記內(nèi)參使用法:只要在二抗孵育時(shí)加入 HRP 標(biāo)記內(nèi)參抗體,按照正常操作即可。 

    2 、普通內(nèi)參:當(dāng)目的蛋白的分子量大小與選用的內(nèi)參蛋白分子量相差不大時(shí),可以*行目的蛋白的抗體溫育顯色和檢測(cè)。然后使用膜再生液(P1650)洗掉膜上的抗體,重新進(jìn)行內(nèi)參蛋白的抗體溫育、顯色檢測(cè)。

    3 、當(dāng)目的蛋白的分子量大小與選用的內(nèi)參蛋白分子量大小相差比較明顯情況下,可以在轉(zhuǎn)膜后預(yù)染,根據(jù)蛋白質(zhì) Marker 的大小將膜剪為大分子量和小分子量?jī)刹糠?,使?nèi)參蛋白與目的蛋白分開。然后兩塊膜分別與內(nèi)參蛋白抗體以及目的蛋白抗體進(jìn)行溫育,二抗溫育以及顯色。 如此下來(lái),各位小伙伴就可以坐等鋒芒畢露的內(nèi)參君為我們擒獲漂亮且理想的內(nèi)參圖片。





產(chǎn)品中心 Products
99热这里有精品| 国产精品V欧美精品V日韩精品 | 亚洲中文字幕无码久久2021| 玩弄JAPAN白嫩少妇HD| 被夫上司欺辱的人妻HD中文版| 东北浪妇交换俱乐部| 丰满大肥婆肥奶大屁股| 精品国产三级A在线观看| jizz国产精品| 狂野欧美性猛交免费视频| 久久久久久无码大片A片| 国产亚洲精品久久久久久久久动漫| 亚洲一区二区三区无码久久| 国产人妻精品一区二区三区不卡| 自拍偷自拍亚洲精品被多人伦好爽| 一本一道色欲综合网中文字幕| 一区二三国产好的精华液| 最美情侣视频免费观看完整版 | 高级艳妇交换俱乐部小说| 男人的天堂AV| 国产精品无码| 777久久人妻少妇嫩草AV| 免费看片免费播放| 调教超级YIN荡护士H| 中文字幕乱码人妻一区二区三区| 免费看片A级毛片免费看| 调教超级YIN荡护士H| 欧美成人看片一区二区三区尤物| 无码精品国产一区二区三区免费 | 最近韩国日本免费高清观看| 狠狠人妻久久久久久综合九色| 午夜精品久久久久久久无码 | 最近中文字幕在线MV视频在线| 人妻中出受孕 中文字幕在线| 久久人人爽人人爽人人AV| 裸身美女无遮挡永久免费视频| 女人下边被添全过视频| 锕锕锕锕锕锕锕好多水社区| 人人妻人人澡人人爽国产一区 | 国产国语老龄妇女a片| 边吃奶边被躁欧美三级|