亚洲日韩乱码中文无码蜜桃臀,无码人妻久久一区二区三区不卡,把高冷校花压在桌上进进出,国产亚洲精品久久久久久国模美

銷售熱線

19126518388
  • 技術(shù)文章ARTICLE

    您當(dāng)前的位置:首頁 > 技術(shù)文章 > 實(shí)時(shí)熒光定量PCR的優(yōu)化(三)

    實(shí)時(shí)熒光定量PCR的優(yōu)化(三)

    發(fā)布時(shí)間: 2021-10-12  點(diǎn)擊次數(shù): 1793次

    本期介紹設(shè)計(jì)引物,得到實(shí)時(shí)熒光PCR引物對(duì),這種方法也可以用于普通PCR。


    1、長(zhǎng)度應(yīng)該在18~30bp,保證結(jié)合的特異性。


    2、熔解溫度(Tm值)應(yīng)在55~60°C,兩條引物的Tm值應(yīng)相差2~3°C。


    3、每條引物3'端應(yīng)該有1~3個(gè)鳥嘌呤或胞嘧啶,這樣做可以減少PCR過程中的非特異性擴(kuò)增。超過3個(gè)時(shí)會(huì)起反作用,發(fā)生“滑動(dòng)效應(yīng)"導(dǎo)致錯(cuò)誤延伸。


    4、引物的GC含量應(yīng)該在50%左右,過高的GC含量會(huì)升高Tm值。


    5、引物中應(yīng)該避免反向重復(fù)序列,因?yàn)檫@會(huì)形成二級(jí)結(jié)構(gòu),影響引物結(jié)合在模板上。


    6、如果是RT-PCR,還需要避免設(shè)計(jì)引物結(jié)合在外顯子序列上,會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果假陽性。正確做法應(yīng)設(shè)計(jì)在長(zhǎng)內(nèi)含子側(cè)翼、或短內(nèi)含子上,又或者是跨越外顯子-外顯子交界區(qū)。


    7、對(duì)引物進(jìn)行脫鹽純化。


    需要注意的是,有時(shí)候當(dāng)你做到了所有要點(diǎn),引物還是有可能無法擴(kuò)增,這時(shí)候就要重新設(shè)計(jì)引物啦。


產(chǎn)品中心 Products
三上悠亚在线观看| 亚洲精品一区二区国产精华液| 被老外添嫩苞添高潮NP| 苍井空亚洲精品AA片在线播放| 够力七星彩排列五奖表最新版本 | 精品人人妻人人澡人人爽牛牛| 亚洲精品无码午夜福利中文字幕| 宝贝我硬了~你含一下它| 亚洲国产精品毛片AV不卡在线| 久久久亚洲精品无码| 久久国产精品久久久久久| 被带到调教室刑床惩罚挠痒痒作文| 狠狠综合久久av一区二区三区| 熟妇高潮精品一区二区三区| 娇妻被黑人粗大高潮白浆| 色婷婷五月综合中文字幕 | 大肉蒂被嘬的好爽H| 办公室啪啪激烈高潮动态图| 久久久99精品免费观看| 日本a片| 久久泄欲网| 国产免费视频| 国产精品成人一区二区三区| 免费午夜爽爽爽WWW视频十八禁| 偷窥 性别 瘾 XXXXX| 天天躁日日躁狠狠躁免费麻豆| 被夫上司欺辱的人妻HD中文版 | 国产成人亚洲精品| 久久偷看各类wc女厕嘘嘘偷窃| 人妻互换亂倫激情| 日本精品巨爆乳无码大乳巨 | 奶水被挤得到处喷HNP| 少妇私密会所按摩到高潮呻吟| 亚洲AV永久无码精品一福利| 国产精品久久久久久久妇| 国产精品丝袜久久久久久不卡| 国产精品女A片爽视频爽| 疯狂揉肉蒂高潮H失禁视频| 亚洲色精品三区二区一区| 免费网站看SM调教打屁股视频 | 宝贝乖女你的奶真大水真多小芳|