亚洲日韩乱码中文无码蜜桃臀,无码人妻久久一区二区三区不卡,把高冷校花压在桌上进进出,国产亚洲精品久久久久久国模美

銷售熱線

19126518388
  • 技術(shù)文章ARTICLE

    您當(dāng)前的位置:首頁 > 技術(shù)文章 > 非肌肉肌動(dòng)蛋白的純化

    非肌肉肌動(dòng)蛋白的純化

    發(fā)布時(shí)間: 2022-12-06  點(diǎn)擊次數(shù): 939次

    材料與儀器

    非肌肉肌動(dòng)蛋白
    DNA 酶Ⅰ緩沖液
    DEAE 柱

    步驟

    1. 準(zhǔn)備貯存液和材料。

    2x DNA 酶Ⅰ緩沖液:

    20 mmol/L Tris-HCl,pH 8.0

    1 mmol/L DTT

    0.4 mmol/L CaCI2

    0.4 mmol/L ATP

    抑蛋白酶肽

    抑蛋白酶

    亮抑蛋白酶肽

    抑胃酶肽 A

    PMSF

    TPCK

    50% 甲醛在 DNA 酶柱緩沖液中

    0.4 mol/L NH4CI 在 DNA 酶Ⅰ緩沖液中

    0.3 mol/L KCl 在 DNA 酶Ⅰ緩沖液中

    DNA酶Ⅰ柱緩沖液

    2. 準(zhǔn)備一個(gè) 5~10 ml 的 DNA 酶Ⅰ的親和柱。

    3. 準(zhǔn)備一個(gè) 0.2 ~1 ml 的 DEAE 柱:用 DNA 酶Ⅰ緩沖液平衡的 DEAE-纖維素。

    4. 通過離心收集細(xì)胞并用等滲鹽溶液(例如 PBS ) 洗去培養(yǎng)液。

    5. 在加蛋白酶抑制劑的 DNA 酶柱緩沖液中重懸細(xì)胞沉淀物。

    6. 用對于感興趣細(xì)胞的標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行細(xì)胞勻漿。

    7. 用相差顯微鏡證實(shí)超過 99% 的細(xì)胞已經(jīng)裂解了。

    8. 100000 g 離心裂解物 45 分鐘。

    9. 用巴斯德吸管轉(zhuǎn)移上清,避免混入脂肪。

    10. 柱子上樣:

    (1) 上清和用 DNA 酶Ⅰ緩沖液加蛋白酶抑制劑平衡了的 DNA 酶Ⅰ親和介質(zhì)混合,并把介質(zhì)/蛋白混合物倒到一個(gè)小桿子中。

    (2) 在裝填柱子時(shí)收集流出液,通過用抗肌動(dòng)蛋白抗體進(jìn)行的免疫印跡、DNA 酶Ⅰ抑制分析或 SDS-PAGE 來證實(shí)有大量肌動(dòng)蛋白留在柱子中。

    11. 用 2 倍體積含蛋白酶抑制劑的 DNA 酶柱緩沖液洗柱子,然后用含蛋白酶抑制劑和 0.4 mol/L NH4Cl 的 DNA 酶柱緩沖液洗柱子。

    12. 用含 50% 甲醛的 DNA 酶Ⅰ柱緩沖液洗脫肌動(dòng)蛋白。

    13. 立即把 50% 甲醛洗脫液上樣到 0.2~1 ml DEAE 柱子上。

    14. 用 5 倍體積的 DNA 酶Ⅰ柱緩沖液洗 DEAE 柱,然后用含 0.3 mol/L KCl 的 DNA 酶Ⅰ柱緩沖液洗脫。分部收集,每管 200 μl。

    15. 檢測收集液的蛋白濃度,然后混合出峰時(shí)的收集液。

    16. 加 MgCl2 使?jié)舛葹?2 mmol/L ( 這是選用于天然肌動(dòng)蛋白),以使肌動(dòng)蛋白聚合,用 SDS-PAGE 分析多肽組成。

    產(chǎn)量應(yīng)該是 5% 左右,所以從濕重 10 g 的細(xì)胞指望得到 2.5~5 mg 純化了的肌動(dòng)蛋白是合理的。


    以上就是本期的內(nèi)容,更多資訊,歡迎點(diǎn)擊安培生物網(wǎng)站鏈接了解更多技術(shù)與產(chǎn)品資訊。


    安培生物科技有限公司介紹:

    安培生物堅(jiān)持為生命科學(xué)研究、活體動(dòng)物轉(zhuǎn)染、大規(guī)模生物生產(chǎn)、基因和細(xì)胞治療領(lǐng)域客戶,提供*細(xì)胞體內(nèi)可代謝的核酸轉(zhuǎn)染試劑;inviCELL™Platelet lysate無動(dòng)物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細(xì)胞擴(kuò)增和生產(chǎn),包括培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞和多種免疫細(xì)胞系等,為制藥公司或者生物技術(shù)公司提供無血清細(xì)胞培養(yǎng)規(guī)模生產(chǎn)服務(wù);提供以植物生物為平臺(tái)基因序列全人源化、*的細(xì)胞培養(yǎng)可分解3D基質(zhì)膠產(chǎn)品;提供內(nèi)毒素≦ 1.0 EU/mL、對細(xì)胞無毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品。安培生物專注為生物醫(yī)藥領(lǐng)域提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù),努力發(fā)展為基因治療、細(xì)胞治療的生物科技企業(yè)


產(chǎn)品中心 Products
性欧美丰满熟妇XXXX性| 中文字幕丰满孑伦无码精品| 国产美女极度色诱视频WWW| 欧美色视频日本片免费| 偷窥 性别 瘾 XXXXX| 一区二区三区中文字幕| 精品乱子伦一区二区三区| 农场主的女儿们 经典K 8| 少妇和公翁系列小说| 久久不射| 双腿被绑成M型调教PLAY| 处破痛哭A√18成年片免费| 寂寞少妇扒开双腿猛烈进入免费看| 亚洲av无码一区二区二三区软件 | 国产SUV排行榜前十名| 欧美精品VIDEOSEX性欧美| 最近免费中文字幕中文高清| 无遮挡1000部拍拍拍免费| 国产好大对白露脸高潮| 我在ktv被六个男人玩一晚上| 2020国产情侣在线视频播放| 啦啦啦中文免费视频高清观看| 无码精品人妻一区二区三区影院| 风雨送春归电视剧全集在线观看| 亚洲AV无码国产综合专区| 男人10处有痣是富贵痣| 成人试看120秒体验区| 亚洲蜜芽在线观看精品一区 | 色之久久综合av人妻熟女黑寡妇| 国产精品久久久久久一区二区三区| 激情97综合亚洲色婷婷五| 国产精品久久久久乳精品爆| 图片区小说区另类春色首页| 无码国产精品一区二区高潮| 亚洲熟妇色XXXXX欧美老妇Y| 午夜无码A级毛片免费视频| 无需付费真人直播视频| 国产精品久久久久久影视| 18禁裸男晨勃露J毛免费观看| 久热国产精品视频一区二区三区| 抱着H不拔出来H|